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ASACI，即抗原特异性激活的细胞免疫技术，是维瑅瑷的核心专利技术之一。维瑅瑷的体外诊断试剂产品大多是基于ASACI技术平台的衍生产品，该技术源于哈佛大学（美国专利号7754219，中国专利号ZL02810886.8），使用的蛋白投递系统为脱毒的炭疽毒素致死因子(N-terminus truncated lethal factor, LFn)，可规模化制备T细胞抗原。

目前常见的T细胞抗原主要可分为3类：合成肽库，蛋白投递系统搭载原长蛋白，原长蛋白^[1]

通过基因工程技术将LFn片段和外源蛋白表达为融合蛋白作为T细胞抗原，可将外源蛋白带入细胞质中，同时诱导外源蛋白特异性的CD4⁺和CD8⁺T细胞响应。

对于LFn的研究始于上世纪90年代：1993年，有实验证实，炭疽杆菌致死因子(lethal factor, LF)N端的1-254位氨基酸残基系列LFn可以介导完整的LF蛋白进入细胞质中^[2]。 1996年和1998年，有实验证实，LFn与8-9个氨基酸的表位肽融合，免疫小鼠后能成功诱导强烈的表位特异性的细胞免疫反应，并保护小鼠免受响应的细菌或病毒攻击^[3,4]。2000年和2001年，有实验证实了LFn携带大抗原的能力，LFn融合蛋白可以把500个氨基酸的蛋白质成功带入细胞质中，并引发相应的细胞免疫反应^[5,6]。

后续的研究转向对于LFn融合蛋白诱导细胞免疫反应的途径上，2002年，实验证实LFn融合蛋白参与MHC-I类途径，诱导CD8⁺T细胞响应^[7]。2005年，实验进一步证实了LFn融合蛋白既可以参与MHC-I类途径，也可以参与MHC-II类途径，同时诱导CD4⁺和CD8⁺T细胞响应^[8]。因此，科学家们预测LFn搭载不同蛋白，除了现有的作为治疗性疫苗有效的抗原投递工具，还有望成为体外检测细胞免疫反应的新方法。

LFn能改善对于免疫缺陷患者的帮助，最初LFn的作用就是应用于艾滋病患者的治疗性疫苗。在维瑅瑷产品——A.TB2试剂盒具体产品的研究试验中，也收集了艾滋病病人，糖尿病患者，免疫抑制剂使用患者的临床数据。在HIV阳性患者中，CD4⁺细胞数大于50时，检测结果不受CD4+细胞数的影响，达到了相关文献中ELISpot方法相同的水平。平行对比实验结果也证实，在HIV感染合并活动性结核患者中敏感性（81.0%）与免疫健全患者基本一致^[9]。另外，在糖尿病患者，服用免疫抑制剂患者中的临床数据表明，其敏感性并不受影响。

当前，维瑅瑷已成熟商品化的LFn相关产品只有结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒（A.TB2试剂盒），但是还有很多其他正在进行中的项目。HIV治疗性疫苗(LFnp24B)在非洲进行了I期临床试验(RV178)，并发表了相关论文^[10]。

参考文献

1 A. Lalvani, Pathan Aa Fau - McShane H., McShane H Fau - Wilkinson R. J., et al. Rapid detection of Mycobacterium tuberculosis infection by enumeration of antigen-specific T cells.

2 N. Arora, Leppla S. H. Residues 1-254 of anthrax toxin lethal factor are sufficient to cause cellular uptake of fused polypeptides.

3 J. D. Ballard, Collier Rj Fau - Starnbach M. N., Starnbach M. N. Anthrax toxin-mediated delivery of a cytotoxic T-cell epitope in vivo.

4 J. D. Ballard, Doling Am Fau - Beauregard K., Beauregard K Fau - Collier R. J., et al. Anthrax toxin-mediated delivery in vivo and in vitro of a cytotoxic T-lymphocyte epitope from ovalbumin.

5 Y. Lu, Friedman R Fau - Kushner N., Kushner N Fau - Doling A., et al. Genetically modified anthrax lethal toxin safely delivers whole HIV protein antigens into the cytosol to induce T cell immunity.

6 L. M. Spyres, Qa'Dan M Fau - Meader A., Meader A Fau - Tomasek J. J., et al. Cytosolic delivery and characterization of the TcdB glucosylating domain by using a heterologous protein fusion.

7 H. Cao, Agrawal D Fau - Kushner Nicholas, Kushner N Fau - Touzjian Neal, et al. Delivery of exogenous protein antigens to major histocompatibility complex class I pathway in cytosol.

8 K. McEvers, Elrefaei M Fau - Norris P., Norris P Fau - Deeks S., et al. Modified anthrax fusion proteins deliver HIV antigens through MHC Class I and II pathways.

9 L. Yu, Mo P Fau - Wei Zeping, Wei Z Fau - Fu Ruiling, et al. Development and evaluation of a new interferon-gamma release assay for the diagnosis of tuberculosis infection in HIV-infected individuals in China.

10 C. Kityo, Bousheri S Fau - Akao Juliette, Akao J Fau - Ssali Francis, et al. Therapeutic immunization in HIV infected Ugandans receiving stable antiretroviral treatment: a Phase I safety study.